Descripción
Debido
a su aplicación industrial, existe un gran interés en la producción de
celulasas con propiedades bioquímicas novedosas. Por ello, en el presente
trabajo se utilizó una estrategia basada en un método de mutagénesis aleatoria
in vivo para la obtención de variantes de la endocelulasa Cel9 del
microorganismo gram-negativo Myxobacter Sp. AL-1. Siguiendo este enfoque, se
obtuvieron cepas transformantes de Escherichia
coli capaces de secretar variantes de la proteína Cel9 cuyas actividades específicas
fueron incrementadas hasta 7.5 veces con respecto a la actividad mostrada por
la enzima nativa. Del mismo modo, se generaron cepas de E. coli productoras de
variantes de la proteína Cel9 con baja o nula actividad enzimática.
Experimentos de subclonación y fraccionamiento celular revelaron que las
mutaciones asociadas con los fenotipos de las variantes de la enzima Cel9
ocurrieron en la secuencia del gen cel9. Así mismo, se demostró que los
fenotipos de las cepas mutantes carentes de actividad enzimática no dependen de
su incapacidad para secretar las proteínas mutantes. Además de su potencial
aplicación biotecnológica, los resultados obtenidos en este trabajo permiten
avanzar en el entendimiento de la relación estructura-función de la celulasa Cel9
de Myxobacter Sp. AL-1.
Castellanos
Juárez, F. et al. (2006). Obtención de variantes hiperactivas e inactivas de la
endocelulasa Cel9 de Myxobacter Sp. Al-1.
Acta Universitaria, 16 (1), pp.
22-28.
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