El sector citrícola es el de mayor importancia dentro del área hortifrutícola del país, constituyendo el 95% de las exportaciones de frutas y siendo el tercer producto agrícola. Los virus de Tristeza y Psorosis, junto con el viroide de Exocortis y otros viroides asociados a esta enfermedad son los agentes virales y viroidales de mayor incidencia en los cultivos citrícolas de nuestro país. Una estrategia altamente eficaz para el control de enfermedades virales en plantas es la producción de resistencia a través de mecanismos basados en el silenciamiento del ARN. El silenciamiento del ARN es un mecanismo basado en la degradación específica del ARN que es desencadenado por la presencia de ARN de doble hebra dentro de las células. Recientemente se han descrito estrategias para silenciar eficazmente cualquier secuencia de ARN deseada. Utilizando construcciones que se insertan en el genoma de la planta y que promueven la formación de ARN de doble hebra es posible silenciar tanto la expresión de genes endógenos como de secuencias génicas virales. En este trabajo se aislaron secuencias parciales de la cápside de los virus de Tristeza y Psorosis y con ellas se realizaron construcciones génicas que promueven la formación de ARN de doble hebra. Estas construcciones consisten en la inserción de las secuencias virales orientadas en sentido y en antisentido, separadas entre sí por un intrón. Las construcciones obtenidas serán utilizadas para la transformación genética de citrus a efectos de obtener plantas resistentes a estos patógenos.
Gallino, J. P. et al. (2011). Realización de construcciones génicas para el silenciamiento de los virus de citrus Tristeza y Psorosis. Agrociencia, 15(2), pp. 11-18.
Asistente del Laboratorio de Biología Molecular Vegetal Gdo. 2.
Nivel I del Sistema Nacional de Investigadores de Uruguay, Instituto de Química Biológica, Instituto de Biología de la Facultad de Ciencias de la Universidad de la República de Uruguay (UdeLaR).
Doctorado Molecular Genetics Swedish University of Agricultural Sciences, Suecia.
Licenciatura en Ciencias Biológicas Facultad de Ciencias - UDeLaR, Uruguay.
Se encuentra en proceso de estudio en Plant resistance against virus diseases Uppsala Genetic Center, Swedish University of Agricultural Sciences, Suecia.
Durante mis estudios de doctorado (1992-1998), mi trabajo se centró fundamentalmente en el estudio de los mecanismos naturales de defensa en plantas frente a patógenos. En particular, mi trabado se centró en las vías de transducción de señales que regulan la expresión de genes de defensa en plantas, frente a la infección con la bacteria Erwinia carotovora. Como resultado de estos trabajos se logró atribuir un rol a las fitohormonas etileno y ácido jasmónico, en la inducción de defensas en interacciones planta-patógeno. Postulamos un modelo en el cual la activación de defensas frente a diversos tipos de patógenos es el resultado de la interacción entre diferentes vías de señalización (Vidal et al 1997, Vidal et al 1998, Norman et al 1999, Vidal et al 2000). Trabajos posteriores a los nuestros confirman la importancia del etileno y el ácido jasmónico como señales en diversas interacciones planta-patógeno. En 1998, accedí al cargo de investigador en Virología Vegetal, Uppsala Genetic Center, cuya investigación principal se centra en mecanismos de resistencia a potyvirus en papa. Un tipo de resistencia al virus PVY, denominado Resistencia Extrema (RE), está determinado por un gen dominante de resistencia (Ry). Mi trabajo consistió en identificar, clonar y estudiar la función de dicho gen en relación a la resistencia a PVY. Aislamos una secuencia de ADN que segrega con la RE en una población de papas, caracterizada en cuanto a su resistencia a PVY (Vidal et al 2002). La sobreexpresión del gen en papas susceptibles, indujo resistencia a PVY concomitantemente con el desarrollo de lesiones necróticas en los sitios de infección, indicando un mecanismo de acción relacionado con muerte celular. A comienzo de 2000 retorné a Uruguay para participar en la creación del Laboratorio de Biología Molecular Vegetal. Inicié junto con jóvenes investigadores en formación, una nueva línea de investigación relacionada con el estudio funcional de genes inducidos por estrés en la planta Physcomitrella patens. Esta planta es un nuevo sistema modelo ideal para estudios funcionales de genes mediante genética reversa, debido a la facilidad para generar mutantes knockout. Nuestro trabajo se centró en la caracterización funcional de proteínas relacionadas al estrés abiótico principalmente en esta planta (Saavedra et al 2006, Ponce de León et al 2007, Papdi et al 2009, Ruibal et al 2012). Nuestro grupo, actualmente integrado por cuatro estudiantes de doctorado, una estudiante de maestría y dos estudiantes de grado, ha generado una colección de mutantes en genes involucrados en la tolerancia a la sequía y salinidad. Actualmente estamos evaluando estos genes como candidatos a mejorar la tolerancia al estrés en cultivos. Paralelamente, integro desde hace 3 años, una red de colaboración en torno al área de estrés hídrico en soja. Nuestro grupo en particular ha aislado y caracterizado funcionalmente un grupo de genes de soja involucrados en la tolerancia a sequía. Actualmente estamos en proceso de solicitud de una patente internacional sobre el uso de estos genes para generar plantas resistentes a la sequía.
Prof. Agregado Biología Molecular Vegetal (cargo Gr. 4, 30 hrs, efectivo). Facultad de Ciencias, Universidad de la República, Montevideo, Uruguay. (2002- a la fecha).
Áreas de Investigación: Mecanismos moleculares de tolerancia al estrés abiótico en plantas (Arabidopsis thaliana, Physcomitrella patens). Estudios funcionales de proteínas relacionadas con el estrés de plantas, mediante la producción de mutantes knockout.
B.Sc. Orientación principal: Biología y Química; University of Uppsala, Suecia.
Ph.D. en Genética Molecular, Swedish University of Agricultural Sciences Uppsala, Suecia.
Nivel I en el Sistema Nacional de Investigadores de Uruguay, Departamento Producción Vegetal de la Facultad de Agronomía de la Universidad de la República de Uruguay (UdeLaR).
Maestría en Producción frutícola, Escuela Nacional de Fruticultura, México.
Ingeniería Agronómica Facultad de Agronomía - UDeLaR, Uruguay.
En los últimos 20 años, desde mi regreso al Uruguay, las líneas de investigación desarrolladas tuvieron como objetivo aportar conocimiento y soluciones en dos áreas de la producción citrícola: (1) Obtención de material de propagación de citrus de alta calidad genética y sanitaria y (2) estudio y manejo del ciclo reproductivo de los principales cultivares de citrus en las condiciones agroecológicas de nuestro país. En el primer caso, se logró realizar un convenio a largo plazo con la empresa MILAGRO S.A. que permitió durante 10 años el ajuste de tecnologías de saneamiento de virus y viroides (termoterapia y microinjerto in vitro), técnicas de indexación (plantas indicadoras, serología, electroforesis) culminando con la creación de un banco de 36 variedades. Durante el desarrollo del convenio se entregaron miles de yemas a la empresa para la incorporación a sus viveros. En el segundo, que actualmente se mantiene en ejecución, se han realizado estudios del comportamiento fenológico de variedades de importancia comerica actual y potencial, y a partir del conocimiento generado, el ajuste y desarrollo de técnicas de manejo para la optimización productiva. En esta misma línea de investigación se han desarrollado también varios proyectos vinculados al estuido y mejora de la calidad interna y externa de frutos cítricos. La estrategia ha sido en forma permanente, el trabajo con el sector productivo tanto en los aspectos operativos de realización de los proyectos como en el cofinanciamiento de gran parte de los mismos. Los resultados obtenidos se han trasmitido al sector mediante reuniones técnicas anuales y en la última década se han implementado y desarrollado tres seminarios de dos días de duración, en los cuales se han presentado los principales resultados de nuestro equipo junto con otros de la Facultad de Agronomía y otros servicios universitarios. Desde el punto de vista académico, se han publicado en revistas arbitradas nacionales e internacionales, especialmente en los últimos años, los principales resultados de la investigación.
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